制干鲜食兼用品种改良岗位

李玉玲 王勇 孙锋 骆强伟

  选育品质优良的无核葡萄新品种是国内外育种的一个重要目标，无核葡萄因食用方便深受广大消费者喜爱。以无核品种为母本杂交胚易败育，胚挽救技术较传统杂交育种扩大了亲本的选择范围，提高了后代无核率，可缩短育种周期。随着科学技术的发展，胚挽救技术已成为无核葡萄主要育种方法之一。

  在胚挽救育种研究中，对幼胚成苗率的影响因素如亲本选择、取样时期、基本培养基种类、外源添加物、移栽方法等对胚挽救育种的效果意义重大。本研究以二倍体种子败育型无核品种红脸无核、昆香无核、康耐诺、碧香无核、粉红无核、爱神玫瑰、苏67自交胚珠为材料，分析亲本选择、取样时期对离体胚珠培养生长发育的影响。本试验旨在探索亲本选择、取样时间对胚挽救效果的影响，为无核葡萄胚挽救育种提供更多的亲本选择。

  1　材料与方法

  试验于2018年5-12月在新疆维吾尔自治区葡萄瓜果研究所葡萄试验基地、组培实验室进行。供试材料为红脸无核、昆香无核、康耐诺、碧香无核、粉红无核、爱神玫瑰、苏67等7种无核葡萄。

  1.1　试验方法

  1.1.1　幼果采集

  授粉后35d开始，每7d采集一次自交幼果，共采摘4次，每次120粒，剪去果柄，自来水冲洗15min。在超净工作台消毒：先用75%酒精冲洗1次，用无菌水冲洗1次，放入次氯酸钠中浸泡10min，再用无菌水冲洗3次。

  1.2.3　胚发育阶段胚珠培养

  消毒后，将取出的胚珠接种在MM3大量+ER有机，微量，铁盐+60g/L蔗糖+5g/L琼脂+3g/L活性炭培养基（pH=5.8）上进行胚发育培养。

  1.2.4　胚萌发阶段胚培养

  培养60 d后，在超净工作台上对胚珠进行剥胚，然后接种到胚萌发培养基WPM+0.2mg/L 6-BA+30g/L 蔗糖+ 5 g / L 琼脂+ 3 g / L 活性炭（pH=5.8）中培养，45d后调查。剥胚率%=（裸胚数/接种胚珠数）×100；成苗率%=（试管苗数/接种胚珠数）×100。

  2　结果与分析

  2.1　亲本选择对胚发育及胚萌发的影响

  由表1可以看出胚发育及胚萌发率由高到低的顺序依次为红脸无核＞昆香无核＞爱神玫瑰＞粉红无核＞康耐诺＞碧香无核＞苏67，说明胚挽救的母本选择在胚挽救中至关重要。

  2.2　不同亲本取样时间的确定

  由表2可以看出，红脸无核的剥胚率和成苗率最高，剥胚率可以达到13.57%，成苗率可以达到6.43%，最佳取样时间为花后56d，昆香无核、康耐诺、碧香无核、粉红无核在花后49d，爱神玫瑰在花后42d。

  3　结果与分析

  本试验表明，7种无核葡萄做亲本，胚挽救由易到难顺序为：红脸无核＞昆香无核＞爱神玫瑰＞粉红无核＞康耐诺＞碧香无核＞苏67，苏67极难胚挽救成功，红脸无核、昆香无核、爱神玫瑰、粉红无核、康耐诺、碧香无核都可以考虑作为胚挽救的亲本。随着胚珠取样时间的延长，成苗率一般都呈现先增加后减少的趋势，说明取样时间对胚挽救的影响，接种时期是影响无核葡萄胚挽救的关键因素之一，过早取样胚发育不良，过晚取样胚已经败育无法成苗，昆香无核、康耐诺、粉红无核、碧香无核以花后49d左右为宜，红脸无核以花后56d，爱神玫瑰花后42d较为适宜。