育种研究室

 唐晓萍 董志刚 李晓梅 谭伟

　　多酚类物质作为葡萄中重要的次生代谢产物之一，对葡萄果实的色泽、风味、口感、营养价值都具有重要的作用，在医疗、保健等方面也具有重要的作用和利用价值，因此近年来，葡萄中多酚物质日渐成为研究的热点。

　　山西省农业科学院果树研究所近年来先后培育了‘早黑宝’、‘秋红宝’、‘无核翠宝’、‘无核丽红宝’和‘晶红宝’5个鲜食葡萄新品种，果实品质优良，为消费者所青睐，在山西的推广面积也逐年增加。

　　本文以这5个鲜食葡萄新品种成熟果实为试材，研究了这5个鲜食葡萄果实酚类物质含量和抗氧化能力差异，为深入了解这5个鲜食葡萄品种特性提供理论依据。

　　1　材料与方法

　　1.1　试验材料

　　供试材料为‘丽红宝’、‘无核翠宝’、‘晶红宝’、‘早黑宝’、‘秋红宝’成熟果实。各品种（系）葡萄栽培于山西省农业科学院果树研究所葡萄育种园，5年生植株，多主蔓扇形架，株行距0.8m×2.5 m。

　　2014年8-10月于各品种（系）果实成熟期于试验田间每品种（系）随机取6个标准果穗，分果穗剪取全部果粒，于保鲜袋中，液氮冷冻，-80℃冰箱保存。11月23日－12月15日在实验室内提取测定果实的酚类物质含量和抗氧化能力。

　　1.2　试验方法

　　（1）果实的酚类物质含量测定 将液氮冷冻的果粒，取果实2 g用研钵研磨成浆，用70%乙醇洗入100 mL容量瓶，保证完全转移入容量瓶。室温，超声波，25 min，用70%乙醇定容，过滤入棕色试剂瓶，滤液为总酚提取液。总酚、单宁含量测定采用Folin-Ciocalteu法，表示为mg 单宁酸/(g•FW)。总类黄酮含量按照氯化铝比色法测定，表示为mg 儿茶素/(g•FW)。原花色素含量采用正丁醇—盐酸比色法测定，表示为mg原花色素/(g•FW)。黄烷醇含量测定采用香草醛-盐酸法测定，参照Waterhouse的方法进行，表示为mg儿茶素/(g•FW)。

　　（2）果实的抗氧化能力测定采用普鲁士兰法评价提取物总还原力，以吸光度（OD值）表示总还原力。

　　DP PH自由基清除能力参照Yemis等和Brand-Williams等的方法，结果以清除率（%）表示。

　　ABTS+•清除能力参考Nenadis等的方法并稍作修改。7mmol/LABTS+•工作液的配制方法：准确称取0.0576g ABTS试剂，用蒸馏水定容至15mL，使用前加0.264mL 140mmol/L过硫酸钾水溶液，室温避光放置12～16 h，用无水乙醇调零后，将吸光度调整至0.700±0.005后备用。将50μL粗提液加入到3.0mLABTS+•工作液中，室温避光反应8 min后，在734 nm波长处测定吸光度。结果以清除率（%）表示。

　　（3） 统计分析 采用Ex c e l2003与SPS 13.0进行各因子的数据分析与LSD差异显著性分析。

　　2　结果与分析

　　2.1　5个鲜食葡萄品种果实酚类物质含量比较

　　各品种果实中各酚类含量具有明显差异。以‘早黑宝’果实中总酚、单宁、总类黄酮、原花色素、总黄烷醇和果皮总花色苷含量最高；以‘秋红宝’果实中总酚、单宁、总类黄酮、原花色素和总黄烷醇含量最低；‘无核丽红宝’和‘晶红宝’果实总酚、单宁含量无显著差异，但后者总类黄酮、原花色素和果皮总花色苷含量显著高于前者；绿色品种‘无核翠宝’果皮为黄绿色，总花色苷含量为0，总酚、总类黄酮含量仅次于‘早黑宝’，单宁、原花色素和黄烷醇含量与‘无核丽红宝’无显著差异。

　　2.2　5个鲜食葡萄品种果实抗氧化能力和酚类物质相关性分析

　　利用统计学相关软件，针对葡萄果实中酚类物质的5个重要含量指标（总酚、单宁、总类黄酮、原花色素和黄烷醇）与3个采用不同方法鉴定其抗氧化能力的指标（总还原力、ABTS+•清除率和 DPPH清除率）进行相关性分析（见表1-3）。

　　结果表明，各品种葡萄果实的抗氧化能力和其总酚、单宁、总类黄酮、原花色素和黄烷醇含量之间均为显著正相关，相关系数在0.8472~0.9995（p<0.01），其中总还原力与各酚类物质含量的相关系数均在0.91以上，酚类物质含量高的抗氧化能力强。选用的3种方法对葡萄果实的抗氧化活性进行评价时，测定结果在不同方法间存在协同性与差异性。