旱区品种选育岗位
李玉玲 王勇 骆强伟
葡萄胚挽救技术是通过选择假单性结实类型的无核葡萄品种,在合子胚败育前进行人工离体培养,以获得完整植株的技术,它可以解决无核葡萄品种做母本时,发生杂种胚早期败育的问题,可显著提高无核葡萄品种培育的效率,在远源杂交、三倍体育种上也有应用。但在育种实践上发现,通过胚挽救技术育成的组培苗长势弱,继代过程中经常出现玻璃化现象。由于苗子弱,根系差,移栽成活困难,对胚挽救苗的成苗率影响很大,为此,我们对胚挽救苗玻璃化的环境影响因素及其移栽方法做了试验研究。
1 材料与方法
观察材料为2009-2011年的胚挽救苗,用于试验的母本材料有红宝石无核、火洲黑玉、SP87133、火焰无核、SP341、无核白鸡心。影响因素有:品种、光照强度、组培瓶的透气性、温度、继代间隔时间。
(1)组培瓶的透气性对胚挽救苗玻璃化的影响
透气性实验:上海稼丰园艺生产的ZP9组织培养瓶和玻璃瓶塑料封口膜 (具有PTFE细菌滤膜 ,上海稼丰园艺生产 )。
(2)组培温度对胚挽救苗玻璃化的影响
温度分设 : 2 2 - 2 5 ℃ , 2 5 - 30℃, >30℃ 以 上。
1.3 光照强度对胚挽救组培苗玻璃化的影响
光照设 : 1 0 0 0 L X 、2000LX,、3000LX,一个培养周期为30d。
1.4 继代间隔时间对胚挽救组培苗玻璃化的影响
继代间隔时间设:30d,40d, 50d。
2 结果
(1)葡萄胚挽救苗玻璃化与透气性的关系:在相同光照和温度等条件下透气性膜和ZP9组培瓶生长前期基本相同,后期使用透气性膜胚挽救苗生长更为健壮,玻璃化现象少,ZP9瓶生长的胚挽救苗达到瓶口时应抓紧时间继代,后期易玻璃化,继代后玻璃化不能恢复正常生长。
(2)温度与玻璃化的关系: 在相同条件下温度高更易发生胚挽救苗的玻璃化现象,一般玻璃化后继代很难恢复。
(3)光照与玻璃化的关系: 培养结果表明,在弱光条件下,苗子生长势缓慢,且玻璃化现象加剧,加强光照胚挽救苗长势强且茎间缩短,茎杆粗壮,生长量适中 。
(4)组培间隔时间与玻璃化的关系:结果表明组培的适宜间隔时间为30d,随着组培时间的延长,玻璃化现象加重,且新根变少,萎缩。
(5)品种与玻璃化的关系: 红宝石无核、火洲黑玉、SP341为母本的胚挽救苗生长更为健壮,玻璃化现象少,SP87133、火焰无核为母本的胚挽救苗长势弱,火焰无核为母本的胚挽救苗叶片薄,节间长,更易玻璃化。
总之,良好的透气性,合适的温度,适当增加光照强度,适时继代是保证胚挽救苗健康生长的必要条件,对于比较轻微玻璃化的胚挽救苗 (叶片玻璃化)在自然光下7d可转为正常苗,但老化严重,不适宜再继代增殖,应抓紧时间移栽,对重度玻璃化苗应加长自然光的照射时间,同时晚上补光待恢复正常生长时抓紧移栽。