北疆综合试验站
抗砧3号是中国农业科学院郑州果树研究所于1998年以河岸580为母本,S04为父本杂交育成的葡萄砧木新品种,2009年通过了河南省林木品种审定委员会审定。该砧木品种植株生长旺盛,嫩梢黄绿色带红晕,幼叶上表面光滑,梢尖有光泽。新梢生长半直立,无茸毛,卷须分布不连续,节间背侧淡绿色,腹侧浅红色。成熟枝条表面光滑,红褐色,节间长12.4厘米。带光泽。成龄叶肾形,绿色,全缘或浅3裂。冬芽黄褐色。
植株生长势旺盛,产条量高,生根容易,根系发达。耐盐碱,高抗葡萄根瘤蚜和根结线虫,能适应新疆地区各类气候和土壤类型,在不同产区均表现出良好的适应性。在南疆的沙土地、石河子地区的偏碱生黏土地上均能正常生长。抗寒性强于巨峰和S04,但弱于贝达。经石河子农业科学研究院试验其与本地部分品种嫁接亲和性较好,但在石河子地区普通的方法繁殖系数较低,为提高繁殖速度,实现当年出苗,进行了该品种的组培快繁技术的研究。
1 试验材料与方法
1.1 试验材料
供试材料取自石河子农业科学研究院葡萄研究所引种的葡萄砧木品种—抗砧3号的当年生嫩梢。取外植体的时间为6月下旬~8月上旬。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的采集和消毒
将采集的外植体先用自来水水冲洗2~3小时以除去表面灰尘,而后用5%的84消毒液消毒10分钟,用无菌水冲洗3次,在无菌条件下75%的酒精快速消毒8秒钟,立即用无菌水冲洗3次,0.1%的升汞消毒6~8分钟(视材料的幼嫩程度而定)后,用无菌水冲洗4~5次以清除残留在枝条表面的升汞。将消毒好的砧木枝条剪成单芽茎段,接入初代培养基中。
1.2.2 初代培养基的筛选
采用MS、1/2Ms(Ms基本培养基大量元素和微量元素浓度减半,铁盐浓度不变,其它各成分同于MS,下同)、GS(曹孜义,1986)基本培养基,附加15~30g/L的食用白糖,7.0g/L的琼脂,pH值调至5.8~6.0。接入供试品种—抗砧3号的外植体,以选择砧木品种最佳的初代基本培养基。配制好的培养基在121℃下高压灭菌20分钟。培养条件:培养温度25~28℃ ,光照强度2000lx,光照时间12 h/d。接种40d后统计萌芽率。
1.2.3 继代诱导生根培养基的筛选
在GS培养基中分别加入不同浓度的6-BA和IAA后接入供试品种,以选择砧木品种最佳的继代诱导生根培养基。接种30天后进行统计不同培养基对葡萄砧木品种组培苗生根的影响。
1.2.4 炼苗与移栽
将株高5~6cm具有2~3条根的试管苗,逐步转移到有散射光的自然环境中炼苗5d左右后,从瓶中取出,洗净根部培养基,再用装有配比好营养土的8cm×8cm的营养钵进行移栽,在温室条件下,相对湿度控制在80%以上,温度控制在28~32℃下培养炼苗,试管苗成活率达90%以上。
2.结果与分析
2.1 初代培养基对外植体萌芽的影响
由表1可知,抗砧3号外植体在不同培养基上萌芽率差异极显著。其中在GS培养基中的萌芽率最高达到74.07%,并且萌发正常健壮地嫩芽比例也较高,接种基部愈伤组织小.而在其它培养基上基部愈伤组织大。由此初步确定出适宜抗砧3号砧木品种的较适宜初代基础培养基为GS培养基。
2.2 继代诱导生根培养基筛选结果
从表2试验数据可以看出,当IAA浓度一定时,6-BA的浓度对单芽茎段生根及增殖具有不同程度的影响,随着6-BA浓度的增加,单芽茎段生根率及增殖倍数也呈现上升趋势,但是达到一定浓度后,反而呈现下降的趋势,但在试验浓度内变化不明显。当6-BA浓度一定时,随着IAA浓度的变化,其生根率及增值倍数也呈现先高后低类似的结果。说明不同浓度的两种激素对抗砧3号的萌芽均具有不同的促进和抑制作用,且相互影响。
方差分析结果表明:IAA浓度在0.05 mg/L ,6-BA浓度在0.4mg/L抗砧3号的生根率和增值倍数最高,与其他处理存在极显著差异,并且根茎粗壮,叶色深绿,因此确定6-BA 0.4mg/L+IAA0.05 mg/L为该品种的继代培养基最优激素配比。
3 结论
3.1 通过对初代培养基萌芽试验数据进行方差分析,进而筛选出在试验培养基类型内,抗砧3号初代培养的最佳培养基为GS,其萌芽率最高达到74.07%。
3.2 植物激素是影响植株再生的另一个关键因素。实验结果表明6-BA和IAA浓度的浓度过高或过低均影响葡萄砧木单芽茎段的生根及增值,且两种激素之间具有一定的相互效应。经方差分析在试验浓度范围内,最终筛选出适宜抗砧3号继代生长的培养基是GS(6-BA 0.4mg/L+IAA0.05 mg/L),生根率达到96%,增值倍数4.5。
3.3 利用组织培养技术获得的葡萄砧木苗,具有分化率高、生长健壮、根系发达、繁殖速率快等特点,其繁殖效率明显优于常规方法,从而可快速获得大量优质种苗,满足了市场的广泛需求。