砧木评价与改良岗位

韩斌 郭紫娟 李敏敏

  摘要：葡萄是一种结果早、产量高、营养丰富、用途广泛、经济效益高的果树，在全球广泛栽培。但是在冬季相对寒冷地区，需要埋土覆盖越冬，埋土、出土工作劳动强度大，生产成本较高，如发生冻害将造成严重经济损失，因此，亟待选育适宜寒冷地区的葡萄新品种。该方法以葡萄枝条为试材，通过霜冻气候室模拟低温冻害，温室沙藏恢复生长，调查枝条的萌芽、生根情况等，可以一次性鉴定成千上万株不同葡萄品种，是一种兼备大群体、快速、准确、直观的葡萄抗寒性鉴定技术，对葡萄抗寒育种具有十分重要的意义。

  关键词：葡萄；抗寒性鉴定；霜冻气候室；沙藏培养

  葡萄是一种结果早、产量高、营养丰富、用途广泛、经济效益高的果树，在全球广泛栽培。但是在冬季相对寒冷地区，需要埋土覆盖越冬，埋土、出土工作劳动强度大，生产成本较高，如发生冻害将造成严重经济损失，因此亟待选育适宜寒冷地区的葡萄新品种。葡萄的抗寒性具有较高的遗传力，不同的葡萄资源其抗寒能力差异显著，建立快速、可靠的葡萄抗寒性鉴定方法，对筛选葡萄抗寒品种具有重要意义。现有鉴定葡萄抗寒性最常用的方法是电导法，但该方法受环境温度、样品浸泡时间、加热时间、及空气中CO2的浓度和其在水中的溶解程度不同等因素影响，造成了测定结果重复性差、鉴定结果不准确。而且该方法操作起来非常复杂，对于鉴定成千上万株不同葡萄品种的抗寒性来说，将是一个巨大的工程，测试人员劳动量很大，而且直观性也不强。现有的鉴定方法无法兼备大群体、快速、准确的鉴定葡萄抗寒性。

  “基于霜冻气候室-温室沙藏培养鉴定葡萄抗寒性的方法”以葡萄枝条为试材，通过霜冻气候室模拟低温冻害，温室沙藏恢复生长，调查枝条的萌芽、生根情况等，可以一次性鉴定成千上万株不同葡萄品种，是一种兼备大群体、快速、准确、直观的葡萄抗寒性鉴定技术，对葡萄抗寒育种具有十分重要的意义。

  1.基于霜冻气候室-温室沙藏培养鉴定葡萄抗寒性的方法的特点

  1.1 可以实现大群体、快速、准确鉴定抗寒性

  本发明利用霜冻气候室模拟霜冻环境，对葡萄1年生枝条进行逆境胁迫，将胁迫后的枝条转入温室沙藏培养，通过调查枝条萌芽情况可以实现超大群体（万株以上）、快速、准确鉴定葡萄的抗寒性。

  1.2 可以实现相同环境、高通量检测

  本发明首次创制了霜冻气候室检测技术体系，采用霜冻气候室模拟低温环境，一次最多可以检测2万株的试验材料。将霜冻气候室处理的葡萄枝条，再采用温室沙藏培养，可以克服一般试验受仪器、场地的限制，实现相同环境、高通量的检测。

  2.基于霜冻气候室-温室沙藏培养鉴定葡萄抗寒性的方法的具体操作

  2.1 测试枝条准备

  于每年的1月5日-10日采集生长正常、无病的当年生成熟枝条为测试枝条，每个测试枝条设置至少3个平行；用作测试枝条的枝条取样部位选自基部第3芽以上的枝条。

  2.2 霜冻气候室处理

  将全部测试枝条放入霜冻气候室内处理10-12h，霜冻气候室内的空气温度为-24~-26℃，相对湿度设置60-65%；所述霜冻气候室为一个封闭且完全黑暗的房间；

  2.3 沙藏培养

  将经过霜冻气候室处理的测试枝条转移至日光温室中沙藏培养，沙藏培养采用沙池进行，将测试枝条水平埋入沙池表面以下10-12cm，浇水一次至浇透；在沙池表面覆盖透光的塑料地膜；培养期间监测沙池表面以下10-12cm处的相对湿度，使相对湿度不低于60%；在日光温室中，使沙池每天从上午7:30~8:30时至14:30~15:30见光；调控日光温室内的温度，使沙池地面以下10-12cm处平均温度在15～20℃；

  2.4 抗寒性鉴定

  以枝条萌芽率作为抗寒性的判断标准，在沙藏培养35～40天后，取出测试枝条统计萌芽率；萌发率=萌芽个数/芽眼个数*100%。