上海综合试验站

方献平 查倩 蒋爱丽 奚晓军 和雅妮

  随着葡萄产业的发展，葡萄灰霉病防控越来越引起生产者的重视。一方面可通过田间管理降低其危害，另一方面选用高抗品种降低发病风险。葡萄抗病性鉴定是葡萄育种过程中非常关键的一环，其方法分田间鉴定和室内鉴定，其中田间鉴定环境因子影响很难控制，操作繁琐，而室内鉴定的实施步骤相对简单，操作可控性更强，具有省工、省时、方便快速和准确性高等特点。为此，我们开展了灰霉病抗性离体叶片快速鉴定的试验，结果如下。

  1　材料及方法

  以‘巨峰’、‘夏黑’、‘金手指’、‘阳光玫瑰’、‘申丰’等12个品种的幼叶为试材。灰霉菌落用PDA培养，将0.5cm大的菌饼接种于葡萄幼叶背面，然后放入人工培养箱（上海皓庄，型号LI280A）中培养，试验设置不同的温度（15℃、20℃和22 ℃）、相对湿度（80%、90%和95%）和时长（2d和3d），组合观察记录叶片感染情况，并用智能叶面积测量系统（托普云农，型号YMJ-CH）测算病斑面积。

  2　结果与分析

  2.1　温度对葡萄叶片灰霉病抗性的影响

  在15℃、20℃和22℃培养条件下，接种2d后观察到，‘巨峰’在20℃时发病最为明显，病斑面积达到了855.30mm2，‘夏黑’和‘金手指’病斑面积分别达到了326.85mm2和186.27mm2。3个品种在15℃下，接种2d后都未见到感病症状，病斑面积都为0mm2，因而接种的灰葡萄孢菌侵染的适宜温度为20℃。

  2.2　相对湿度对葡萄叶片灰霉病抗性的影响

  在相对湿度80%，90%和95%的培养条件，接种 2d后观察到，‘巨峰’和‘夏黑’在相对湿度90%和95%下都呈现出更易发病的现象，‘金手指’80%时发病程度略重于95%，病斑面积分别为167.42 mm2和75.43 mm2， 3个品种在相对湿度为90%时发病程度达到最大值。由此可见，相对湿度为90%是灰葡萄孢菌接种的适宜湿度。

  2.3　接种时长对葡萄叶片灰霉病抗性的影响

  病菌接种时长的观察结果表明，随着侵染时间延长（从2d延长到3d），虽然是加剧感染病斑的扩大，但病菌的抗性区分度在变小，差异系数从0.899下降到了0.225（图1）。因此，接种2d后的病情指标可以区分发病差异程度，是最佳接种时长。

  2.4　抗性快速鉴定方法在葡萄品种上的应用

  应用建立的离体叶片快速抗性鉴定方法，在20℃和相对湿度90%条件下接菌2d，不同葡萄品种的抗性结果显示：灰霉病菌抗性从高到低依次为‘申丰’‘沪培1号’‘金手指’‘夏黑’‘申玉’‘申华’‘信浓乐’‘阳光玫瑰’‘申爱’‘巨峰’‘沪培3号’和‘醉金香’（图2）。

  3　结论

  低温、高湿是灰霉病流行的主要影响因素，本研究通过系统比较不同温度、湿度和接种时间长短，进一步发现20℃比15℃和22℃更加适合灰葡萄孢菌的繁殖,相对湿度90%促进病菌的侵染，接种2d后的病情指标葡萄灰霉病的抗性差异，这为栽培技术调控抑制灰霉病发生提供了理论依据。

  本研究以3个主要葡萄品种为试材，对灰葡萄孢菌接种条件进行研究，结果表明，温度20℃、相对湿度90%是灰葡萄孢菌的最佳侵染条件，形成了葡萄灰霉病抗性离体叶片快速鉴定方法。应用该法在不同葡萄品种上进行灰霉病抗性鉴定，结果显示，‘申丰’和 ‘金手指’对灰葡萄显示高抗，而‘醉金香’和‘巨峰’品种高感灰霉病，为葡萄生产的灰霉病防控具有指导意义。