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“底来特”胚挽救技术 [2016/5/15 14:18:06] 来源: 作者:Admin
 

旱区品种选育岗位

李玉玲 王勇 骆强伟

 

  底来特(De l i g h t 欧亚种,1946年发表。由Scolokertekkiralynoje 26 × Sultanina Marble杂交选育而成,是一个优质、较早熟、绿色无核品种。可以选做优质、较早熟无核品种的亲本。以下介绍底来特胚挽救主要技术要点:

 

  1 采集花粉

 

  在新疆鄯善地区一般是 5月上旬初花期,此时花序已经开始伸长,出现光泽,花蕾略显黄色,花序中有1-2朵小花开放时,采下发育正常的整个花序,除去顶部,带回实验室室内,先把花序放置等花序稍微有点萎蔫时取下花蕾,用力揉搓,然后在硫酸纸上铺平晾干,一般需要8h,用筛网过滤后收集花粉,用研钵研磨至细粉状,装于小瓶中贴上标签放入干燥剂放置于冰箱中。

 

  2 去雄

 

  去雄时间一般在开花前2-3d,不宜过早过晚,过早坐果率低,过晚此时花序开放较多,选材变少同时闭花授粉率加大,影响杂交效果。一般选择生长健壮的植株的中上部发育正常的花序去雄,去雄先从花序基部开始 ,用手轻轻去处花冠防止碰伤柱头,去雄后要仔细检查防止有残留花粉,去雄后喷水及时套纸袋,挂上标签,标明品种和去雄日期。

 

  3 授粉

 

  一般在去雄2-3d后有少量柱头分泌粘液时开始授粉,用镊子捏着棉花在花粉瓶中蘸取花粉后在花序上轻轻抖落,底来特属于不易掉粒的品种可以采取蘸粒的方法,用蘸了花粉的棉花在柱头上轻蘸,为了保证授粉成功,一般连授3d。对杂交组合的授粉日期做详细记载。

 

  4 胚珠培养

 

  所用培养基为MM3大量+ER有机、微量、铁盐的固液双层培养基,底来特一般在授粉后55d左右,果粒稍稍变软时取样,收取杂交果穗放入冰箱冷藏,接种步骤为:将果穗果粒剪下统计,放入玻璃瓶中在水下冲洗20min,置超净工作台上,75%乙醇浸泡约1min,无菌水冲洗 1 次,再用有效氯含量为0.5%次氯酸钠溶液消毒20min,无菌水冲洗 3 次,切开果粒取出胚珠接种于内装30ml培养基的组培角瓶中,每瓶接种25粒,然后倒入液体培养基,以刚没过种子为准,即采取固液双层培养基培养。

 

  5 胚培养

 

  待胚萌发8w后从胚珠中取出胚接种在WP培养基上,接种于试管中,试管放置在试管架上面,研究表明红光对胚发育具有一定的刺激作用,可以促进胚萌发。后期成苗时进行强光以提高成苗质量,壮苗,提高移栽成活率,待萌发长成正常苗后接种至1/2MS+0.35mg/LIBA继代培养基中进行扩繁。

 

  6 胚挽救苗的移栽

 

  所用基质配比为2份腐叶土+1份蛭石,基质和水均灭菌后待用。由于组织培养中培养瓶或试管内的水分循环,一方面是试管苗吸收的水分,从叶面气孔蒸腾和培养基向外蒸发,另一方面水气凝结后又进入培养基,结果造成瓶内空气的相对湿度接近于100%,远远大于瓶外的空气湿度,因而试管苗的蒸腾量极小,因此在胚挽救苗的移栽过程中保湿是影响其成活的一个主要因素,在移栽过程中可以采用在纸杯上覆盖塑料杯的做法来保持空气湿度,刚开始塑料杯基本密封纸杯从而保证了湿度,在移栽10d基本有新叶长出的时候在塑料杯上扎洞慢慢降低湿度,在移栽1个月后转入温室,光照强时刚开始应遮阳,后慢慢增加光照,逐步适应温室环境后转为日常管理。胚挽救苗的移栽宜早不宜迟,早期移栽在炼苗室中进行,外界温湿度对其影响不明显,移栽成活后在温室定植时温度过高直接影响成活率,同时定植过晚枝条在越冬时不能成熟,不能安全越冬。