砧木品种选育岗位
尹勇刚 赵胜建 郭紫娟
1 葡萄芽冻害评价方法
葡萄的休眠芽在低温环境下会遭受冻害。一般在仲冬遭遇超低温，有时超过休眠芽的耐寒最大低温极限；有时在春秋季节在芽眼未达到其最大抗寒能力时遭遇低温冻害。鉴定葡萄芽损伤程度，可以为修剪计划提供指导依据，并可以评估翌年的预期产量。
休眠芽也叫做复合芽，每个芽均具有发育成新梢的能力。主芽最大含有发育较好的花原基，二级芽（副芽）有部分有花原基，三级芽（副芽）一般只有一个叶原基。当主芽受到损伤时，二级芽和三级芽才会萌发。然而，当冻害发生时，主芽首先死亡，随后是二级芽和三级芽。
芽眼冻害鉴定目前主要有二种方法。
一是水培验证法。将带有茎节的芽插在合适厚度的泡沫板上，如图1-a，1-b所示，基部没入水中，芽在板上方。萌芽所需时间因取样时间，水温，品种而不同。该方法仅能获知芽的存活与否，却不知是主芽，副芽还是三级芽。
二是横切鉴定法。即用刀横切休眠芽观察芽内部的冻害发生情况。图2给出了横切步骤。具有生活力的主芽、副芽和三级芽是绿色的，若发生棕褐色或深色变化则表明芽已死亡。横切的第一刀能看到主芽存活状态，若死亡可切第二刀，查看副芽或三级芽存活状态。若只有三级芽存活，通常也不能萌生新枝。
2 枝条及主干冻害评价方法
对枝蔓和主干的冻害损伤发生在韧皮部和木质部。韧皮部是内皮中的营养输送组织，而木质部是水分输送组织。严重的韧皮部损伤需要较长时间恢复，而木质部冻害造成的损失更大。如果木质部发生严重或者完全损害，树体则不能为树冠输送充足的水分，从而导致树体萎蔫乃至死亡。
在初冬和冬末，枝条的韧皮部比芽更耐寒，仲冬时反而不如芽抗寒。而木质部任何时候抗寒能力都比韧皮部和芽强。评价枝条时，应观察韧皮部和木质部。为此，应切一系列的与枝条纵向平行的切口来查看可能的损伤。
如图3所示，第一刀应切除薄薄的外树皮的木栓层，这样就可以看到韧皮部了。接下来一刀切的更为深点，就能看到木质部。如果组织未受损伤，会呈现绿色。如果发生了冻害损伤，颜色会处于发暗的棕绿色到完全的褐色之间（在主干中同样可以看到）。主干损伤是是最难评价的部分。一旦对主干造成损伤，则会导致过多的徒长枝，发生根癌病，树干分裂，或植株死亡。
在最易受到严重冻害损伤的区域选择20株葡萄树体，作为初始评价样本。如果该区域没有发生显著损伤，则其他区域也不应出现冻害，不必进一步取样。若高冻害发生区有接近50%的冻害发生时，则需要进一步取样，后续取样应遍布整个葡萄园区，并选择主干最易受到冻害的部分如接近土壤表面等。
此外，可记录是否有可测量的雪层覆盖以及持续覆盖多久，因为雪层可保护雪层表面下主干不受冻害，而雪上层主干的南侧在晴天可以因雪层反射光而升温，但夜间会受到冻害。为防止造成环剥，应小心切取。切主干时不应超过主干周长的1/4，切取方法与枝条切取方法相同。健康的组织是绿色的，受损的木质部呈乳白色至棕褐色，受损韧皮部为棕褐色（图4）。
3 根部冻害评价方法
田间自然鉴定法：田间自然鉴定是最先在抗寒性研究工作中采用的方法。它是将研究植物的种类暴露在自然条件下，经过冬季低温后，调查植株存活状况，从而预测冻害发生程度。该方法以枝条或根为调查部位，可根据冻害程度进行评级，做出具体的评价，具有真实、可靠、直观的优点。通常冻伤严重时，根表皮和横切面均发生褐变，呈黑褐色。
电导率法： 电导法由He a l d（1902）首创，Dexter（1932）将其应用于测定植物的抗冻性。此法的基本依据是假定生活组织受冻害越重，解冻后从细胞流出的物质越多，从而组织浸出液的电导率越高。电导率是一种易于测定的活体水平的指标，其变化反映出脂膜透性的大小，用以检测细胞的平均损伤程度，灵敏度较高，因而当前被广泛用于抗寒性的比较鉴定。
电导法通常以葡萄枝条或根段为试材，并以电解质外渗百分率（直接电导率/煮沸电导率）作为其冻害伤害率。如测定根系的电导率，取样后将剪下的根在自来水龙头下充分淋洗以除去泥沙和根表死皮，并剪除须根。再用蒸馏水和去离子水各漂洗一遍。晾干，将根段切成0.2~0.3厘米长的小段。称取1克试材小段装入50毫升三角瓶中，加入20毫升去离子水，加盖，置20~23℃下保温4~5小时。保温期间用手震荡1~2次。用电导率仪测定浸出液的直接电导率C1，然后将三角瓶置沸水浴中煮20分钟杀死组织，静置3~4小时后再测其煮沸电导率C2。最后计算电解质渗出率（=C1/C2×100%）。通常将电解质渗出率50%作为不可逆损伤的临界值，高于50%表明组织死亡。
低温放热分析法：低温放热分析是指植物组织在低温下结成冰晶，伴随放热，通过计算机差异热分析系统（Differential ThermalAnalysis 简称DTA）检测、记录并分析这种低温放热进而评定植物组织抗寒能力的一种技术。
低温放热分析同样适用于葡萄组织抗寒性的检测，通过测定葡萄根、枝条和芽眼在低温胁迫下的放热温度点，分析其致死温度，通过比较致死温度的高低判断每个葡萄品种的抗寒性强弱。该仪器精确度高，易用性强。