哈尔滨综合试验站

肖丽珍　鲁会玲　覃杨

 

 

奥迪亚无核葡萄在保护地栽培表现为早熟、品质优、丰产性好，抗病性强，是黑龙江省保护地栽培具有潜力的无核葡萄品种，也是培育早熟、抗病无核新品种的亲本之一。影响无核葡萄胚挽救的因素有多方面，亲本的基因型、接种的不同时期、所选择的培养基及培养条件等方面。本研究以奥迪亚无核葡萄试材，进行了葡萄果实、胚珠生长发育动态观察测定，以期为今后无核葡萄胚挽救杂交育种确定最佳接种时期提供理论支撑。

 

1 材料与方法

 

试验在黑龙江省农科院园艺分院葡萄试验园进行。大棚栽培，株行距0.5m×2.0m，扇形整枝，管理条件较好。谢花后，随机选取5株，每株3穗果，每穗选取3粒果实进行测量。间隔7d测量1次果实及胚珠的纵/横径，并记录果实中胚珠数量，根据所测得的数据汇成生长发育曲线，观察期生长变化及胚珠数量的变化。盛花后30d开始，间奥迪亚无核葡萄幼胚发育动态与胚培养隔7d采集田间幼果，剥离胚珠在离体条件下进行胚珠培养,以此确定最佳的胚挽救时期。

 

2 结果与分析

 

（1）奥迪亚无核葡萄胚珠、胚发育动态

 

奥迪亚无核葡萄果实生长为双S曲线，见表1。果实纵径/横径达到最大在花后70d，花后42d是果实第一个生长高峰，以后逐渐变软，花后49d开始着色， 63d果实成熟；花后42d胚珠纵/横径达到最大，分别为0.549/0.3470cm，0.349/0.2050cm，49d部分胚乳变浅黄，56d胚珠数量逐渐减少，胚逐渐败育，63d胚乳变黄，70d胚乳变褐色，胚囊中空。胚乳退化从果实变软后开始，认为胚发育最佳时期在花后42d后，即花后43～49d。两年的结果为胚珠纵/横径生长最大时期与果实第一次生长高峰存在同步现象。

 

（2）奥迪亚无核葡萄胚珠数量变化

 

随着果实发育，胚珠数量逐渐减少。胚珠数量从花后35d开始下降，由多数2～3胚/果变为1～2胚/果；胚珠数量大幅度下降在花后42d后，减少到1～2胚/果，到果实成熟时绝大多数变为瘪粒。因此，胚发育的最佳时期应在胚珠大量败育之前。调查发现，胚珠数量高低不一致，分析可能因为在设施内栽培，通风条件影响，授粉不均匀所导致。

 

（3）奥迪亚无核葡萄胚培养时期确定

 

盛花后30d开始，间隔7d采集奥迪亚幼果，剥离胚珠，无菌条件下取出胚珠接种在培养基上，及时记载接种的胚珠数，进行胚珠内胚培养，培养8 周后调查胚发育率（胚珠发育数/胚珠数×100），调查时胚珠膨大、绿色视为发育良好的胚珠，发育培养基为MS基本培养基并添加IBA1.0mg/L，BA0.4mg/L和NAA0.2mg/L，而后转接到萌发培养基1/2MS上，调查胚萌发率。培养条件为：恒温25±1℃、光周期为14h /10h（光/暗）。

 

 

表2得出，胚珠、胚发育时期主要集中在花后42～49天，若延迟培养,胚的发育率和萌芽率均显著降低。奥迪亚无核葡萄品种胚珠、胚接种的最佳时期为花后42～49天左右，果实外观形态标准为果实软化期开始后一周左右，即奥迪亚无核葡萄在果实及胚珠达到最大时期后一周相吻合。

 

3 结论与讨论

 

（1）奥迪亚无核葡萄果实生长表现双S形曲线，从第一个生长高峰时开始，果实硬度逐渐降低，而后开始变软，着色到果实成熟，浆果的发育呈现持续发展的趋势。本试验奥迪亚无核葡萄在果实发育后期膨大明显，可能由于灌水所致。

 

（2）奥迪亚无核葡萄胚珠发育与果实发育最大的时期达到同步，果实变软期后一周为胚珠发育的最佳时期，到果实着色期，胚珠表皮逐渐变褐，而后胚开始败育，胚的最佳发育时期在果实软化期后3～7d。

 

（3）在胚培养中发现，培养基上有的胚珠体积增大,珠被外表呈绿色,剥开后胚和胚乳已经败育；而有的胚珠珠被变褐，其胚和胚乳却发育完好,而且可以萌发。调查中发现，花后56d有的果实中还有发育较好没有败育的胚珠和胚，有的果实内胚珠完好，但里面的胚已变褐，失去活力，胚的发育与胚珠发育存在不同步现象。

 

（4）奥迪亚无核葡萄胚珠、胚的纵、横径生长动态只能为接种最佳时期提供参考，只能从果实的外观对接种时期有一个初步的界定，此时期后一周左右为接种的主要时期，此期外接种也有少量胚萌发，因此除在胚萌发率高的时期集中进行胚挽救外，可以适当扩大取材时期，以保证发育较晚、较好胚的培养。

 

（5）试验中胚萌发率较低，可能与培养基的选择及配方有关，需要进一步试验研究和探讨，以提高胚的萌发率。