北京市农林科学院林业果树研究所
孙磊 闫爱玲 张国军 徐海英
1 材料与方法
1.1 材料
试材来自北京市农林科学院葡萄资源圃内的葡萄欧亚种品种‘京秀’、‘香妃’及其杂交后代植株，均为露地栽培4-5年生自根树，采用单臂篱架，多主蔓扇形整枝栽培，株行距0.5m×1.5m米，使用常规的栽培管理措施。
1.2 取样与预处理
取样时间为2010年8-10月，待四个品种果实完全成熟时开始采收（测糖仪测定达到最大含糖量）。采样时兼顾阴阳面，叶幕层内外和上中下果穗，以及每穗葡萄肩、中、顶部，分散随机取葡萄果实80-100粒，分成三组（三个重复），液氮速冻后于-80℃超低温冰箱保存，用于实验时，4℃解冻，果肉用榨汁机迅速榨取，破碎后，皮渣浸提140min后，4000rpm，离心10min，取上清液待用。
1.3 香气成分检测
参照张明霞等HS-SPME方法萃取样品中的香气物质。15ml的样品瓶中加入5ml的样品、1g
NaCl、30μl
1.992g/l的内标2-戊醇-
4-甲基和磁力转子后，迅速用带有聚四氟乙烯隔垫的样品瓶盖拧紧后置于磁力搅拌加热台上，40℃，搅拌加热30min，样品瓶中的气-液相香气物质达到平衡后，将已活化或热解析过的PDMS/CAR/DVB固相微萃取头（美国Supelco公司生产）插入样品瓶的顶空部分，萃取头距离液面2cm。在40℃搅拌加热条件下，吸附30min，样品瓶中香气物质达到气-固和气-液平衡，然后将萃取头插入气相色谱进样口250℃，热解析25min。
利用Agilent 6890GC和Agilent5975B
MS联用(Agilent, 美国)分析样品中的香气物质；所用的毛细管柱为HP-INNOWAX 60 m×0.25mm×0.25
μm (J & W scientific, 美国)。载气为高纯氦气，流速为1ml/min；固相微萃取手动进样，采用不分流模式，插入气相色谱的进样口，进样口温度为250℃，热解析25min。柱温箱的升温程序为：40℃保持5min，然后以3℃/min的速度升温至200℃，保持2min。质谱接口温度为280℃，离子源温度为230℃，电离方式EI，离子能量70ev，质量扫描范围为20-350u。每个样品做三次重复。
对采集到的质谱图用NIST 05谱库检索，并结合有关文献进行核对，确定香气成分的化学组成，按峰面积归一法测定各个组分的百分含量，再结合保留时间和保留指数等参数对组分进一步确定。
1.4 统计分析
按峰面积归一法分析香气成分的百分含量，统计各种成分在组合亲本和杂交后代中分布情况，对数量性状计算中亲值、子代平均值、子代变异系数，对质量性状进行卡方检验。
2 结果与分析
选用京秀×香妃的杂交44个后代单株果实和香妃×京秀的杂交12个后代单株果实为材料，通过顶空固相微萃取的方法，关注产生玫瑰香味的萜烯类物质，共检测到52种萜烯类化合物，其中40种能准确定性和定量，另外12种未能定性，在京秀×香妃的杂交后代中，13种萜烯在后代连续分布，27种萜烯在后代出现分离。
2.1 数量性状遗传的物质
里那醇、α萜品醇、氧化玫瑰醚、香叶醛、香叶醇、橙花醇、大马士酮和紫罗兰酮等是典型的数量性状遗传，这些物质在后代中连续分布，如表1所示，具有代表性的几种化合物的遗传趋势见图1-3。
2.2 质量性状遗传的物质
香茅醇、橙花醛、柠檬烯、氧化里那醇、橙花醚、松油烯醇、罗勒烯等在后代中符合3：1的分离规律。α萜品烯、1,7-Octadiene-3,6-diol, 2,6-dimethyl-， 樟脑，2,6-Dimethyl-1,3,5,7-octatetraene,E,E-在后代中符合1：1的分离规律。异松油烯、月桂烯、别罗勒烯、脱氢里那醇、5-hepten-2-ol-6-methyl-在后代中符合15：1的分离规律。如表2所示。
2.3 各种化合物在后代中的相关性分析
选择28种重要的萜烯类化合物，分析这些物质在后代中的遗传分布和相关性，从图4中可以看出，nerol、geraniol、gamageraniol、beta-citronellol的含量具有显著相关性，terpinolene、alfa-terpinene、beta-myrcene、l
i m o n e n e、a l l o o c i m e n e、4-terpinenol具有显著相关性。Ne r a l、be t a -phe ll andr ene、limonene、alfa-terpinenol、alfaterpinene、cosmene这些化合物两两之间的相关系数都大于0.7，E-Z-alloocimene、 alloocimene、terpinolene、beta-myrcene两两之间的相关系数都大于0.8。