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“赫什无核”胚挽救技术体系优化 [2013/12/26 18:15:03] 来源: 作者:Admin

无核品种选育岗位

 

  采用赫什×红宝石无核杂交组合;每年5月13日采取红宝石无核的花粉,5月14日对赫什无核进行去雄,5月15~17日三天进行杂交授粉,分别授粉20穗,花后60~70 天采取果穗,将田间采摘的幼果带回实验室后,剪成小穗放入广口瓶内,先用自来水冲洗,用70% 乙醇浸润30秒后用无菌水冲洗1次,将广口瓶放入超净工作台,倒入含有效氯1%的次氯酸钠溶液浸泡果粒15分钟,期间振荡2~3次,再用无菌水漂洗2~3次。

 

  在超净工作台上用无菌的镊子和手术刀在培养皿中将无菌果粒剖开,从剖开的果粒中选取胚珠培养,采取固液双层胚珠发育培养基,以MM3+6%蔗糖+0.05%水解酪蛋白+0.3%活性炭+0.7% 琼脂作为固体培养基;ER+0.3%活性炭作为液体培养基,每个三角瓶内接种10个胚珠,进行胚珠离体培养。

 

  6 0 天后在解剖镜下剖开胚珠,将发育胚接种在WPM+1.0mg/ L I A A + 0 . 5 m g / L B A + 0 . 5 m g / LGA3+2%蔗糖+0.05%水解酪蛋白+0.3%活性炭+0.7%琼脂的固体胚萌发培养基上,每个250mL的玻璃三角瓶接1个胚,胚刚接种7~10天内进行暗培养,胚萌发长成苗子,包括完整苗和畸形苗。