中国农业大学农学与生物技术学院

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　程玉琴 王琦

　　目前葡萄卷叶病在我国的发生十分普遍，严重制约我国葡萄生产和葡萄酒产业。至今已发现有5种葡萄卷叶伴随病毒（Grapevineleafroll-associated virus，GLRaV）与该病相关，它们均属于长线形病毒科（C l o s t e r o v i r i d a e ）。大部分G L R a V s 为该科卷叶病毒属（A m p e l o v i r u s ） 成员， 其中GLRaV-1和GLRaV-3分在该属的亚组I（subgroup I），GLRaV-4及其几个变异株系，即GLRaV-5, -6, -9,-De, -Pr and –Car分在该属的亚组II（subgroup II）；GLRaV-2属于长线形病毒属（Clos terovi rus），而GLRaV-7目前还未确定是哪个属的成员。

　　为了摸清与我国葡萄卷叶病相关的主要GLRaVs种类，我们调查了新疆、宁夏、辽宁、河北、山东、河南、吉林、甘肃、浙江、江苏、四川、安徽、福建、云南、陕西、湖北、北京、天津、上海等19省、市、自治区的72个葡萄园和一个葡萄种质资源圃，采集了几百份葡萄植物样品，并对其中的249份样品（80个葡萄品种和砧木贝达）用实时荧光RT-PCR结合常规RTPCR进行了GLRaV-1、GLRaV-2、GLRaV-3、GLRaV-4、GLRaV-5的发生率调查。结果表明，GLRaV-3的检出率为100%，表明GLRaV-3是与我国葡萄卷叶病相关的最主要病原物。GLRaV-1, GLRaV-2 andGLRaV-4 的检出率分别是24.9%(62/249), 15.3% (38/249)和 0.80%(2/249)。 GLRaV-3 单独侵染的样品为66.3% (165/249)， 其余样品则混合侵染了GLRaV-3 与一种或两种其它的GLRaVs，其中GLRaV-3与 GLRaV- 1 的混合侵染最常见(18.5%, 46/249)。

　　在我们调查的所有葡萄品种中，不管是我国原生的葡萄品种如龙眼、白牛奶，木纳格及山葡萄品种双红、双丰、左山一、左山二，还是引进的国外葡萄品种如红地球、夏黑、巨峰等，均检测出了GLRaV-3。同时砧木贝达及葡萄品种赤霞珠、梅鹿辄、蛇龙珠、霞多丽、巨峰、红地球、青提、夏黑、美人指、亚都蜜 、金手指、玫瑰香、阿德良盖、维多利亚、奥古斯特、还有山葡萄品种左山一和双红混合侵染了2-3种GLRaVs。

　　我们还对GLRaV-3中国分离物进行了遗传变异分析，结果表明GLRaV-3中国分离物变异较大，在遗传进化树上可以分为5个组；同时还在其CP基因上发现重组现象，且重组多发生在种质资源圃中。

　　虽然GLRaVs的传播途径主要是通过苗木和繁殖材料，但由于GLRaV-3、GLRaV-1等也可以通过介壳虫、粉蚧等传毒，因此要求我们在重新栽植无病毒葡萄苗的老果园或在现有卷叶病零星发生的果园中，一定要严格防控介壳虫、粉蚧等，从而最大限度地减少卷叶病的扩散或发生。