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南疆综合试验站
唐冬梅
无核葡萄杂交胚挽救技术是选育无核葡萄新品种的重要方法之一。它将传统的葡萄杂交授粉与新兴的生物技术即杂交胚珠离体无菌培养相结合，最终获得杂交后代。目前胚挽救技术已为世界各国选育无核葡萄的主要方法。在花期对配置杂交组合的父母本品种进行杂交授粉后，经过适时采集杂交胚珠离体培养，胚离体萌发，至成苗继代，获得的杂交苗下一步将进行的炼苗移栽，是制约无核葡萄杂交育种效率的又一重要技术环节，只有移栽成活进入大田的胚挽救苗株系才能进行下一步田间农艺性状的筛选鉴定。
要提高胚挽救苗移栽成活率，关键措施的是培养壮苗，其次是适时适地移栽，移栽过程的每一步都必须耐心细致的管理。
培养健壮无菌苗是保证杂交胚挽救苗最终成活的首要条件。在胚萌发发育形成正常苗后，应尽快进行继代扩繁以保证移栽苗的基数，同时给无菌苗提供充足的营养、光照和适宜的温度条件以促进无菌苗快速健壮生长。继代扩繁培养基使用1/2MS+IBA0.1mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5～7.0g/L+活性炭2g/L，培养室温度在25～30℃，光照强度3000lx以上，每个150～200mL三角瓶无菌接种1～2个长度1.5cm左右的茎段。在适宜条件下，一般接种7～10d后茎段开始生根，培养30d左右，胚挽救苗可长出3～5cm长的1条以上白色根，根尖呈淡黄色。这时是最适炼苗移栽期，无菌苗的根尖和茎尖生长点正处于迅速分裂期，移栽后易于迅速分裂生长，有利于成活，而在根系已呈黄褐色时，移栽成活率将会受影响。所以应根据炼苗移栽的适宜时期确定移栽用无菌苗的继代接种时期。
适时适地移栽包括在适当的气温条件和适宜的苗龄。在春季气温开始上升的2～3月底，将长有无菌苗的三角瓶放置在光强逐渐增强和有昼夜温差的温室或培养室窗台边进行光照锻炼7～15d。在试管苗移栽的前1～2d可将封口膜逐渐解开透气以便锻炼试管苗的叶片气孔开合能力。同时准备试管苗移栽基质，将珍珠岩∶筛细的园土＝1∶1混匀加少量腐熟过筛的有机肥作营养土，或购买的营养基质，装入营养钵2/3高度，用1000倍的多菌灵液浇透灭菌，或将移栽基质进行高压灭菌后分装入底部扎孔的纸杯2/3高度备用。移栽前准备好1000倍的多菌灵溶液，透明塑料杯（塑料杯口要比纸杯口略小），清水，镊子，笔，标牌，记录本，托盘，小勺，浇水用塑料烧杯等物品。移栽时将三角瓶内倒入少量清水，用镊子夹住试管苗根颈部，轻轻晃动将琼脂清除干净，放入准备好的营养钵或纸杯，用小勺取湿润的珍珠岩∶筛细园土＝2∶1的营养土或营养基质轻轻掩埋根部，立即浇1000倍的多菌灵液，扣上透明塑料杯保湿，逐个标记记录株系号（如在温室移栽时再扣小拱棚保持湿度）。移栽苗环境温度控制在20～35℃，并注意遮荫。3d以后开始逐渐缓慢降低湿度，至10～15d即可以去除保湿覆盖物，同时逐渐增加光强，每天至少3次定期观察移栽苗情况，发现营养基质干透时即浇1000倍的多菌灵液，不干不浇，以保持根系透气性有利于发新根。并每7d浇一次1/4MS大量元素营养液。
移栽过程中关键是注意逐渐降低湿度，避免湿度变化幅度过大，以防萎蔫。试管苗从无菌环境转到移栽基质中的时期，尽量保持周围的无菌环境对于保证试管苗的成活是很有益的，特别是对于较弱苗而言。因为处于弱光、恒温和高湿环境中生长的试管苗，叶片气孔大且无开闭功能，根系吸收功能极弱，必须要在能保湿、恒温、适度光照的条件，气孔才能恢复开闭功能，同时尽快促进新根生长，恢复根的吸收功能，才能有效地使移栽幼苗不断生长，过渡到旱生环境。
移栽的胚挽救苗在适应了外界环境的温湿度，新根已经伸长后，即准备移出室外，需进行逐步的增加光照和昼夜变温锻炼1周以上，以避免日烧。同时准备苗圃地，平地，起垄，铺膜，浇水。在4～5月间，选择阴天或晴天的下午光照较弱时，将胚挽救苗移栽到苗圃地。在移入田间苗圃后的前2周内，需搭遮阴棚进行遮阴，注意常浇水以保持土壤湿润，使幼苗逐渐过渡到田间环境。苗圃地的田间管理工作主要为及时浇水除草，防治病虫害，打杈绑缚，以促进枝条成熟。
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