"
育种研究室旱区品种选育岗位；
骆强伟、李玉玲、王勇、孙锋、伍国红
红宝石无核为美国葡萄育种学家 Harold Olmo于1968年选育出的晚中熟鲜食无核品种，1983年引入我国， 1991年引入新疆维吾尔自治区葡萄瓜果开发研究中心， 该品种果穗大、色泽鲜艳、品质好、耐运，在新疆、陕西、宁夏、辽宁、河南、山东等地均有栽培，且为无核葡萄新品种选育的重要亲本。以下介绍红宝石无核胚挽救主要技术要点：
1. 杂交授粉
去雄时一般选择树势旺盛植株的中上部健壮花序，在母本初花前3-4d去雄。去雄后，用清水冲洗花序，并给去雄花序套上纸袋，记载去雄时间。葡萄花粉的生活力与花蕾所处位置有关，基部的萌芽率高，花粉管也长，中部的次之，顶部花粉的萌发率最低，花粉管也最短。所以采集花粉时应该采集中上部的花粉。取花粉的时间均为各父本的初花期，将父本植株上生长健壮的花序带回取出花粉，装入小瓶中低温干燥保存。人工授粉分2-3次进行，第一次在母本去雄后2-3d，观察有粘液时进行，用镊子捏着沾上花粉的棉花轻轻抖落进行授粉，对于柱头不易掉落的品种也可采用把花粉粘在柱头上的方法，重新套好纸袋，记载授粉时间。注意使用不同的花粉时，镊子和手必须用75%的酒精消毒。
2.胚珠培养
所用培养基为MM3大量+ER有机、微量、铁盐的固液双层培养基，红宝石无核一般在授粉后55d左右收取杂交果穗放入冰箱冷藏，接种步骤为：将果穗果粒剪下统计，放入玻璃瓶中在水下冲洗20min，置超净工作台上，75%乙醇浸泡约1min，无菌水冲洗1次，再用有效氯含量为0.5%次氯酸钠溶液消毒20min，无菌水冲洗 3 次，切开果粒取出胚珠接种于内装30ml培养基的三角瓶中，每瓶接种20-25粒，然后倒入液体培养基，以刚没过种子为准即采取固液双层培养基培养。
3.胚培养
待胚萌发8周后从胚珠中取出胚接种在WP培养基上，接种于试管中，试管放置在试管架上面，前期一般不予光照，光照对胚的发育无明显的促进作用，在有小苗长出时给予光照。一般认为，光照有利于胚芽生长，而黑暗有利于胚根生长。多数学者认为，以光暗交替为适宜，胚发育阶段应给予充足的光照，萌发初期给予弱光，后期成苗时进行强光以提高成苗质量。待萌发长成正常苗后接种至1/2MS+0.35mg/LIBA继代培养基中进行扩繁。
4.胚挽救苗的移栽
所用基质配比为2份椰糠+1份腐叶土+1份蛭石，基质和水均灭菌后待用。由于组织培养中培养瓶或试管内的水分循环，一方面是试管苗吸收的水分，从叶面气孔蒸腾和培养基向外蒸发，另一方面水气凝结后又进入培养基，结果造成瓶内空气的相对湿度接近于100%，远远大于瓶外的空气湿度，因而试管苗的蒸腾量极小，因此在胚挽救苗的移栽过程中保湿是影响其成活的一个主要因素，在移栽过程中可以采用在纸杯上覆盖塑料杯的做法来保持空气湿度，刚开始塑料杯基本密封纸杯从而保证了湿度，在移栽10d基本有新叶长出的时候在塑料杯上扎洞慢慢降低湿度，在移栽1个月时转入温室，刚开始遮阳后慢慢增加光照，逐步适应温室环境后转为日常管理。
"