中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心

董雅凤 张尊平 范旭东 任芳 胡国君

　　指示植物鉴定是利用某些植物对不同病毒的特异性症状反应来确定病毒的存在及种类。指示植物包括木本指示植物和草本指示植物两类。

　　木本指示植物鉴定法是最常用、最可靠的葡萄病毒检测方法。其优点是，能检测几乎所有已知的病毒病害，灵敏度高（与ELISA 相似），所需设备简单（温室和土地），大多数实验室均可开展。检测时，须设阴、阳对照；同一指示植物，每个样品必须嫁接3株以上。鉴定葡萄病毒病的主要木本指示植物及葡萄病毒病在其上的症状表现见下表1和彩图1~5。葡萄病毒病木本指示植物鉴定通常采用下述3种方法。

　　嵌芽嫁接法：预先培育指示植物的扦插苗。待指示植物的新梢长出4～5片叶后，将冷藏的待检芽嫁接到指示植物节间，然后剪掉上部枝干。待长出新枝叶后观察症状。

　　芽接扦插法：将指示植物枝条剪成有三个节的插条，剔除下部两节的芽。在插条上部的节间嫁接待检测芽。将插条扦插在温室内的沙土中，促进指示植物生根、发芽。待指示植物长出4～5片叶后，移至田间定植。观察症状反应。

　　绿枝嫁接快速鉴定法：嵌芽嫁接法和芽接扦插法一般需半年到二年的时间。为缩短鉴定时间， 1985年日本寺井康夫首创了绿枝嫁接法，此法现已被广泛采用。其程序为，先培育指示植物的扦插生根苗，春季，选择指示植物生长健壮的新梢，剪去上端，仅留下部10～15cm长部分。待检接穗（带1～2个节）去掉叶片，留下叶柄。劈接于指示植物上，然后用蜡或薄膜保护接穗顶端，减少水分蒸发。在22℃～26℃条件下，20～60天后，扇叶、卷叶、斑点、脉坏死、脉花叶等病毒病即可显症。